组织培养法育葡萄苗

葡萄苗的培育方法有很多，如单芽塑料袋育苗、火炕育苗、电热育苗、地膜覆盖育苗等等。今天我们就来介绍其中的一种——组织培养育苗，从字面义我们就可以知道，这就是通过用组织培养法育葡萄苗的一种方法。

一、葡萄嫩梢采集与消毒

取5-10厘米长出5-7片叶子的大树或扦插苗的嫩梢，去掉幼叶。用自来水将其冲洗3-5分钟，再在70％的酒精中浸泡30-40秒，然后用蒸馏水冲洗2-3次，再放入0.5％氯化汞溶液中进行7一10分钟消毒，最后用无菌水冲洗5-6次后备用。

　　二、培养基制作与筛选

　 （一）茎尖培养方

11／2MS培养基6-苄基嘌呤（6-BA）0.5一lppm个荼乙酸（NAA）0.01ppm水解乳蛋白（LH）100ppm蔗糖2％琼脂0.6％配制，氢离子浓度调到1585纳摩／升（pH5.8）。在98.06千帕的压力下，高压灭菌20分钟，放凉待用。

　 （二）茎叶分化培养方

11／2MS培养基赤霉素1ppm吲哚丁酸0.5ppm6-节基膘吟1ppm蔗糖2％琼脂0.6％，氢离子浓度调到1000纳摩／升（pH6.0）。在98.06千帕高压下灭菌20分钟后备用。

　 （三）幼根分化培养方

用Bs大量元素培养基蔗糖4％吲哚乙酸1ppm6-苄基嘌呤0.08ppm琼脂7％，氢离子浓度1000纳摩／升（pH6），经高压灭菌20分钟，冷凉备用。

　　
　　三、接种

在干净的工作台上，将彻底消毒过的备用嫩枝剪截2厘米核的单芽茎段，将其下部插入灭菌后的试管培养基中，芽痕高于培养基面3-5毫米，每管插1-3个茎段，在黑暗处培养48小时，再转入间歇光照（两支40瓦日光灯下，每天照10个小时）培养，温度保持在25-28℃，以后光照时间每天可延长12-14小时，光照强度为2000-2500勒。

　　四、继代培养

将试管苗剪成带叶单芽段，不必消毒，插人培养基中，一般10一15天开始生根，30-35天可长成5.6片叶的小苗，在适宜条件下，1年可繁殖数万株试管苗。

　　五、炼苗移栽

试管苗长成后移到温室或塑料大棚里，在温度为20-25℃的自然光照下炼苗。过两周后揭开试管塞，让它在自然光照、温度、湿度锻炼4-5天。用镊子夹叶柄将小苗从培养基中取出，洗去培养基残留物，直接栽入温室或大棚中的小拱棚里的砂壤土或粗砂里，浇透底水。棚内的湿度要保持在90％左右。10厘米下的地温应稳定在15℃左右，光照为4000-5000勒。当15-20天后见幼叶变绿，就可以移植到大田里了，成活率达80％以上。如果棚内温度过高，就要采取通风、盖苇帘遮荫降温、喷洒凉水等方法，来提高棚内空气湿度和土壤湿度，为炼壮苗创造条件。